示差折光檢測器(Differential Refractive Index Detector,簡稱DRI)是一種廣泛應(yīng)用于高效液相色譜(HPLC)分析的檢測器,具有靈敏度高、能耗低等特點。本文將介紹
示差折光檢測器的原理及其在HPLC分析中的應(yīng)用。
一、DRI的原理
DRI依據(jù)樣品和參比溶液在檢測窗口前不同折射率的差異來進行檢測。其原理基于菲涅爾衍射和干涉現(xiàn)象,設(shè)σ1和σ2分別為樣品和參比溶液的折射率,當它們通過一個相同厚度的檢測窗口時,會發(fā)生相位差Δφ,滿足:
Δφ=2π(σ1-σ2)t/λ,其中t為窗口厚度,λ為光的波長。
這個相位差導(dǎo)致入射光束被分成兩束,分別經(jīng)過樣品和參比溶液,最后再次合并。這兩條光線產(chǎn)生干涉時,會形成干涉圖像。當樣品溶液的折射率變化時,干涉圖像也會隨之改變,從而可以檢測到樣品的折射率變化。
二、DRI在HPLC中的應(yīng)用
在HPLC分析中,DRI主要用于檢測含有小分子溶質(zhì)的流動相,如糖類、氨基酸、藥物等。常見的DRI系統(tǒng)由光源、檢測窗口、光學(xué)系統(tǒng)、信號放大器和數(shù)據(jù)采集裝置等組成。下面介紹DRI在HPLC中的具體應(yīng)用:
1.檢測低極性化合物
對于一些低極性的化合物(如脂肪酸、酚類等),它們一般難以通過紫外檢測器進行檢測。而通過DRI檢測則無此問題,因為DRI可以對這些化合物進行高效靈敏的檢測。
2.檢測糖類
在食品、制藥等領(lǐng)域中,對糖類的檢測十分重要。傳統(tǒng)的糖類檢測方法通常采用色譜柱后端的直接折光法,但這種方法存在誤差較大、分離度不夠高等問題。而采用DRI方法則可以提高檢測的精度和準確性。
3.應(yīng)用于制備液相色譜
在制備液相色譜中,可以使用DRI對離子交換樹脂進行監(jiān)測,以確定洗脫時機和分離效果。通過DRI檢測可以準確地測定離子交換樹脂的折射率,并據(jù)此判斷樣品的組成和純度。